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双色球基本走势图删除:shRNA表達克隆

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   shRNA表達克隆是將針對靶基因設計shRNA(小發夾結構RNAi)靶點序列,然后將其裝于表達載體中,我公司現可提供4套表達載體,可用于對人、小鼠、大鼠以及其他物種的全基因組范圍的基因表達抑制研究。我公司還提供相應的全長人類和小鼠基因的ORF表達克隆,可用于相應基因的功能獲得研究,還可用于shRNA克隆的確證。
圖1. 使用H1 或 U6 啟動子的表達載體構建的shRNA克隆

   shRNA表達克隆的特性    
1.所有shRNA靶點序列的選取均經過準確算法計算。根據基因的不同, shRNA其莖的長度在19到29堿基對之間。這些保證shRNA克隆表達后有很高的表達抑制效率和最低的脫靶效應(off target effect)。


2.克隆shRNA 所采用的載體有慢病毒載體和以哺乳動物細胞為宿主的載體,各類載體擁有不同的啟動子和跟蹤標記基因可供選擇。


3.載體中所帶有的綠色熒光跟蹤標記基因( eGFP )可以用于監測質粒載體的轉染效率和轉導病毒的感染效率。


4.載體結構上帶有穩定細胞株的篩選標記(嘌呤霉素)和綠色熒光跟蹤標記基因(EGFP ),這些特性使得該載體既能用于穩定抑制效應的研究,也

5.可用于瞬時抑制效應的研究。


6.使用慢病毒載體系統,可轉導shRNA進入常規的分裂細胞,以及不分裂而難以轉染的目的細胞株。


7.載體的各部分序列已經過測序,包括啟動子、編碼shRNA的正義和反義鏈、發夾結構、終止子和其他接頭序列。

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